2/4区，3号种子蒂姆苦战三盘，3-6/7-6(0)/6-0逆转送蛋富乔维奇，艰难晋级第3轮，蒂姆第三轮的对手将是意大利选手索内戈，后者6-4/6-4战胜同胞马杰；7号种子卢布列夫同样上演逆转好戏，在与德国名将施特鲁夫的比赛中，卢布列夫6-7/6-1/6-4艰难过关；卢布列夫第三轮将遭遇西班牙选手阿古特，西班牙人两盘力克加林，如愿晋级。
3/4区，12号种子戈芬2-6/1-6脆败阿根廷选手德尔波尼斯，遗憾无缘第三轮。在备受关注的俄罗斯德比中，卡拉采夫6-2/6-4战胜同胞、3号种子梅德维德夫，如愿闯进第三轮。这也是他对阵世界前十球员取得的第5场胜利。
而梅德韦杰夫在本场中的表现更是突破下限，他先是在比赛中碎碎念埋怨自己，在第二盘被破掉关键一局后，梅德韦杰夫大声说道：“你喜欢像狗一样躺在泥地里打滚吗？这红土场地真是太烂了。”
而打丢一个球后，梅德韦杰夫又开始发飙了，“我的妈啊，伟大的意大利人，别乱打球了可以吗？不是的，我可以没有乱打。”当比赛快要结束的时候，梅德韦杰夫对看台上的赛事官员说道，“我实在打不下去了，麻烦你取消我的比赛资格吧，这样对所有人都是好事。”
到比赛最后一局时，ATP的导播都忍不住了，直接将比赛画面切至黑屏，然后将镜头拉到远景，直至比赛结束。
4/4区，赛会2号种子纳达尔克服率先遭破发危机，两盘均在盘末取得关键破发，7-5/6-4战胜19岁小将辛纳，顺利晋级第3轮。赛后，纳达尔称赞了辛纳本场的表现“他是个技术全面的优秀球员。无论正、反手都相当出色，更可怕的是他还随时随地在进步、在提高。"
纳达尔在第三轮的对手将是加拿大选手沙波瓦洛夫，后者两盘完胜持外卡出战的特拉瓦利亚；马德里大师赛冠军、德国名将兹维列夫直落两盘横扫资格赛选手德里安，德国人将在第三轮对阵锦织圭。
女单方面，巴蒂、萨巴伦卡、穆古拉扎、斯瓦泰克等名将悉数晋级。科贝尔收到哈勒普的退赛大礼同样晋级。而小威廉姆斯与大坂直美则爆冷出局。
1/4区，今年红土发挥极为出色的巴蒂与萨巴伦卡双双奏凯，两人距离会师1/4决赛仅差一场比赛。世界第一巴蒂克服开场慢热，以6-4/6-1击败凭借保护排名出战的哈萨克斯坦名将舍维多娃，收获今年第26场胜利，成功晋级16强；巴蒂第三轮将对阵库德梅托娃，后者6-4/6-4淘汰持外卡参赛的加西亚；
7号种子萨巴伦卡则取得红土7连胜，她在比赛中轰出53记制胜分，挽救13个破发点中的12个，7-5/6-1淘汰西班牙选手托尔莫，取得本赛季的第25场胜利，强势晋级16强。下一轮，萨巴伦卡将对阵美国小将高芙，美国姑娘苦战三盘淘汰17号种子萨卡里。
2/4区，三位种子选手全部经历苦战。两届赛会冠军、5号种子斯维托丽娜以2-6/6-3/6-4逆转阿尼西莫娃，涉险晋级16强。下一轮，斯维托丽娜将对阵两届大满贯冠军得主穆古拉扎，西班牙人克服决胜盘1-4落后，最终以2-6/6-0/7-5艰难逆转美国资格赛选手佩拉。
15号种子斯瓦泰克在首盘挽救三个盘点，3-5之后连赢九局，最终以7-5/6-1击败凯斯，小遇挑战晋级16强。她将在下轮对阵克雷吉茨科娃，后者6-1/6-4挑落4号种子肯宁，收获职业生涯第一场TOP10胜利。
3/4区，科贝尔收到哈勒普退赛大礼，科维托娃三盘不敌兹沃娜列娃。3号种子哈勒普在战至6-1/3-3（0-30）的时候左小腿不慎受伤，随即宣布退赛，卫冕之旅就此终结，科贝尔晋级16强。
赛后，哈勒普确认左小腿肌肉撕裂，并在社交媒体上发布了一则声明：“很不幸，超声波检查显示，我的左小腿有撕裂的情况。我将在明天进行核磁共振检查，以便更加详细地了解伤势，但目前我们不确定需要多长时间才能康复。以这样的方式结束罗马征程让我感到无比失望，但我会竭尽所能处理好伤病，争取早日回归赛场。非常感谢大家的支持，我会随时更新我的进展。”
另一场比赛中，两位前世界第二兹沃娜列娃和科维托娃时隔近十年再度相遇。从资格赛突围的俄罗斯人以6-4/3-6/6-4力克科维托娃，收获复出以来的第二场TOP10胜利，晋级16强将对阵卡-普利斯科娃。卡普6-2/6-3淘汰塞瓦斯托娃。
4/4区，小威廉姆斯与大坂直美双双爆冷出局。时隔两个月后，23届大满贯冠军小威廉姆斯重回赛场，而本场比赛又是她生涯第1000比赛，但美国人却没能迎来一场胜利。小威廉姆斯6-7(6)/ 5-7不敌去年法网四强波多罗斯卡，第17次亮相罗马第三次首战出局（2005、2009）。阿根廷姑娘收获个人第三场TOP10胜利，接下来将和马尔蒂奇争夺八强席位。
2号种子大坂直美同样没能取得胜利，在与美国选手佩古拉的比赛中，日本姑娘6-7/2-6败下阵来。
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